Perspectivas atuais da Engenharia de Tecidos da articulação temporomandibular / Perspectivas Actuales de la Ingeniería de Tejidos para la Articulación Temporomandibular / Current Perspectives of Tissue Engineering for the Temporomandibular Joint

Introdução: As limitações das terapias atuais para doenças degenerativas da articulação temporomandibular (ATM) levaram ao aumento do interesse em estratégias regenerativas. A engenharia de tecidos (ET), combinando células-tronco, arcabouços e fatores de crescimento, pode fornecer uma substituição biológica funcional e permanente das estruturas da ATM, além de prevenir o avanço de doenças degenerativas. Objetivo: Este artigo descreve as perspectivas atuais da ET das estruturas da ATM em modelos animais. Metodologia: As abordagens da ET foram categorizadas de acordo com as estruturas primárias da ATM: 1) o disco articular, 2) o côndilo mandibular e 3) a fossa glenóide e eminência articular. Resultados: As áreas com a maior quantidade de estudos são o côndilo mandibular e disco articular, em estudos que abordam o uso de arcabouços tridimensionais, de origem sintética e/ou natural, podendo ou não estar associados a células tronco (diferenciadas ou não) e a fatores de crescimento. Conclusão: A ET da ATM ainda é uma área relativamente nova, em desenvolvimento e em constante avanço. Os avanços tecnológicos desenvolvidos nessa área têm o potencial de auxiliar no desenvolvimento de terapias mais eficientes e menos invasivos... (AU)

Introducción: Las limitaciones de las terapias actuales para las enfermedades degenerativas de la articulación temporomandibular (ATM) han llevado a un mayor interés en las estrategias regenerativas. La ingeniería de tejidos, que combina células, andamios y factores de crecimiento, puede proporcionar un reemplazo biológico funcional y permanente de las estructuras de la ATM, además de prevenir el avance de enfermedades degenerativas. Objetivo: Este artículo describe las perspectivas actuales de la ingeniería de tecidos de las estructuras de la ATM en modelos animales. Metodología: Los enfoques de ingeniería de tejidos se clasificaron según las estructuras primarias de la ATM: 1) el disco articular, 2) el cóndilo mandibular y 3) la fosa glenoidea y la eminencia articular. Resultados: Las áreas con mayor número de estudios son el cóndilo mandibular y el disco articular, en estudios que abordan el uso de estructuras tridimensionales, de origen sintético y/o natural, que pueden o no estar asociadas a células (diferenciadas o no) y con factores de crecimiento. Conclusión: La ingeniería de tejidos de la ATM es todavía un área relativamente nueva, en desarrollo y em constante avance. Los avances tecnológicos desarrollados en esta área tienen el potencial de ayudar en el desarrollo de terapias más eficientes y menos invasivas... (AU)

Introduction: The limitations of current therapies for degenerative diseases of the temporomandibular joint (TMJ) have led to increased interest in regenerative strategies. Tissue engineering (TE), combining stem cells, scaffolds, and growth factors, can provide a functional and permanent biological replacement of TMJ structures, in addition to preventing the advancement of degenerative diseases. Aim: This article describes current TE perspectives of TMJ structures in animal models. Methods: TE approaches were categorized according to the primary TMJ structures: 1) the articular disc, 2) the mandibular condyle, and 3) the glenoid fossa and articular eminence. Results: The areas with the greatest number of studies are the mandibular condyle and articular disc, in studies that address the use of three-dimensional scaffolds, of synthetic and/or natural origin, which may or may not be associated with stem cells (differentiated or not) and with growth factors. Conclusion: TE of the TMJ is still a relatively new, developing, and constantly advancing area. The technological advances developed in this area have the potential to assist in the development of more efficient and less invasive therapies... (AU)

Perspectivas atuais da engenharia de tecidos da articulação temporomandibular / Perspectivas Actuales de la Ingeniería de Tejidos para la Articulación Temporomandibular / Current Perspectives of Tissue Engineering for the Temporomandibular Joint

Introdução: As limitações das terapias atuais para doenças degenerativas da articulação temporomandibular (ATM) levaram ao aumento do interesse em estratégias regenerativas. A engenharia de tecidos (ET), combinando células-tronco, arcabouços e fatores de crescimento, pode fornecer uma substituição biológica funcional e permanente das estruturas da ATM, além de prevenir o avanço de doenças degenerativas. Objetivo: Este artigo descreve as perspectivas atuais da ET das estruturas da ATM em modelos animais. Metodologia: As abordagens da ET foram categorizadas de acordo com as estruturas primárias da ATM: 1) o disco articular, 2) o côndilo mandibular e 3) a fossa glenóide e eminência articular. Resultados: As áreas com a maior quantidade de estudos são o côndilo mandibular e disco articular, em estudos que abordam o uso de arcabouços tridimensionais, de origem sintética e/ou natural, podendo ou não estar associados a células tronco (diferenciadas ou não) e a fatores de crescimento. Conclusão: A ET da ATM ainda é uma área relativamente nova, em desenvolvimento e em constante avanço. Os avanços tecnológicos desenvolvidos nessa área têm o potencial de auxiliar no desenvolvimento de terapias mais eficientes e menos invasivos... (AU)

Introducción: Las limitaciones de las terapias actuales para las enfermedades degenerativas de la articulación temporomandibular (ATM) han llevado a un mayor interés en las estrategias regenerativas. La ingeniería de tejidos, que combina células, andamios y factores de crecimiento, puede proporcionar un reemplazo biológico funcional y permanente de las estructuras de la ATM, además de prevenir el avance de enfermedades degenerativas. Objetivo: Este artículo describe las perspectivas actuales de la ingeniería de tecidos de las estructuras de la ATM en modelos animales. Metodología: Los enfoques de ingeniería de tejidos se clasificaron según las estructuras primarias de la ATM: 1) el disco articular, 2) el cóndilo mandibular y 3) la fosa glenoidea y la eminencia articular. Resultados: Las áreas con mayor número de estudios son el cóndilo mandibular y el disco articular, en estudios que abordan el uso de estructuras tridimensionales, de origen sintético y/o natural, que pueden o no estar asociadas a células (diferenciadas o no) y con factores de crecimiento. Conclusión: La ingeniería de tejidos de la ATM es todavía un área relativamente nueva, en desarrollo y en constante avance. Los avances tecnológicos desarrollados en esta área tienen el potencial de ayudar en el desarrollo de terapias más eficientes y menos invasivas... (AU)

Introduction: The limitations of current therapies for degenerative diseases of the temporomandibular joint (TMJ) have led to increased interest in regenerative strategies. Tissue engineering (TE), combining stem cells, scaffolds, and growth factors, can provide a functional and permanent biological replacement of TMJ structures, in addition to preventing the advancement of degenerative diseases. Aim: This article describes current TE perspectives of TMJ structures in animal models. Methods: TE approaches were categorized according to the primary TMJ structures: 1) the articular disc, 2) the mandibular condyle, and 3) the glenoid fossa and articular eminence. Results: The areas with the greatest number of studies are the mandibular condyle and articular disc, in studies that address the use of three-dimensional scaffolds, of synthetic and/ or natural origin, which may or may not be associated with stem cells (differentiated or not) and with growth factors. Conclusion: TE of the TMJ is still a relatively new, developing, and constantly advancing area. The technological advances developed in this area have the potential to assist in the development of more efficient and less invasive therapies... (AU)

Uso de los factores de crecimiento presentes en el plasma rico en plaquetas como un tratamiento alternativo de lesiones músculo esqueléticas en animales / Use of growth factors present in platelet-rich plasma as an alternative treatment for musculoskeletal lesions in animals / Uso de fatores de crescimento presentes no plasma rico em plaquetas como tratamento alternativo para lesões musculo esqueléticas em animais

Resumen Se realizó una revisión sistemática del uso de plasma rico en plaquetas (PRP) en animales, seleccionando 105 artículos de referencia, publicados en los últimos 8 años (2012 a 2020) de las revistas Veterinary Medicine International, Scientific Reports, BMC Veterinary Research, Platelets, Biomedicine and Pharmacotherapy entre otras y validadas en las siguientes bases de datos: Pubmed, Web of Science, Sciencedirect, Scielo, Medline, Embase y Scopus. Limitando solo las revistas con altos rankings ayudados con las clasificaciones de revistas por scimago journal. Solo 35 artículos cumplieron los criterios de selección; articulándolo con necesidades actuales en la medicina veterinaria, buscando una nueva biotecnología y proyectándose hacia la medicina regenerativa, basándose en reconstrucción de tejidos vivos para contrarrestar daño o remplazo de función de órganos lesionados. Una de estas herramientas es el plasma rico en plaquetas (PRP) con sus factores de crecimiento (FC) Transformante ß (TGF ß), fibroblástico básico (FGFb), derivado de plaquetas (PDGF), del endotelio vascular (VEGF), tejido conectivo (CTGF) y epidérmico (EGF). Actualmente el (PRP) es un bioestimulante tomado como base por estudios en medicina humana y medicina veterinaria, observando su efectividad en el proceso de consolidación ósea en pacientes clínicos. Se recogieron evidencias científicas presentadas en literatura médica con respecto al PRP como una alternativa de tratamiento en el manejo de fracturas y lesiones músculo esqueléticas, con ello se logra determinar la importancia de la estandarización del procedimiento (PRP) en uso, preparación, almacenamiento y administración.

Abstract A systematic review of platelet-rich plasma (PRP) use in animals was carried out by taking 105 reference articles published during the last 8 years (2012 to 2020) in Veterinary Medicine International, Scientific Reports, BMC Veterinary Research, Platelets, Biomedicine and Pharmacotherapy; they were validated in the following databases: PubMed, Web of Science, ScienceDirect, SciELO, Medline, Embase and Scopus. The search was limited to just journals having a high impact factor; the SCImago journal rank (SJR) indicator (i.e. a sophisticated citation analysis algorithm) was also used. Only 35 of these articles met the selection criteria: i.e. coordinating content with current needs in veterinary medicine, seeking new biotechnological approaches and promoting regenerative medicine based on reconstructing living tissue to counteract damage or replace injured organs' function. One such tool is platelet-rich plasma (PRP) with its derivative growth factors (GF): transforming growth factor-ß (TGF-ß), basic fibroblast growth factor (bFGF), platelet-derived growth factor (PDGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), connective tissue growth factor (CTGF) and epidermal growth factor (EGF). PRP is currently used as a biostimulant, acting as the basis for human and veterinary medicine studies; its effectiveness regarding bone/fracture healing/regeneration in clinical patients has been observed. Scientific evidence in the pertinent medical literature regarding PRP as an alternative treatment for managing fractures and musculoskeletal injuries was collected, thereby determining the importance of standardising the PRP procedure regarding its use, preparation, storage and administration.

Resumo Foi realizada uma revisão sistemática da utilização de plasma rico em plaquetas (PRP) em animais, com 105 artigos de referência, publicados nos últimos 8 anos (2012 a 2020) das revistas Veterinary Medicine International, Scientific Reports, BMC Veterinary Research, Platelets, Biomedicina e Farmacoterapia entre outros e validados nas seguintes bases de dados: Pubmed, Web of Science, Sciencedirect, Scielo, Medline, Embase e Scopus. Limitar apenas os periódicos com classificações altas ajudou com as classificações de periódicos pelo jornal scimago. Dos quais apenas 35 artigos atenderam aos critérios de seleção; articulando-se com as necessidades atuais da medicina veterinária, buscando uma nova biotecnologia e projetando-se na medicina regenerativa, baseada na reconstrução de tecidos vivos para neutralizar danos ou substituição de função de órgãos lesados. Uma dessas ferramentas é o plasma rico em plaquetas (PRP) com seus fatores de crescimento (FC) ß transformador (TGF ß), fibroblasto básico (FGFb), derivado de plaquetas (PDGF), endotelial vascular (VEGF), tecido conjuntivo (CTGF) e epidérmico (EGF). Atualmente (PRP) é um bioestimulante tomado como base para estudos em medicina humana e veterinária, observando sua eficácia no processo de consolidação óssea em pacientes clínicos. Foram coletadas evidências científicas apresentadas na literatura médica a respeito do PRP como alternativa de tratamento no manejo de fraturas e lesões musculoesqueléticas, determinando a importância da padronização do procedimento (PRP) no uso, preparo, armazenamento e administração.

Avaliação do tratamento de alterações estéticas faciais com uso de um protocolo operacional desenvolvido para a aplicação de plasma rico em plaquetas / Evaluation of the treatment of changes aesthetic facial with the use of an operational protocol developed for the application of platelet rich plasm

Introdução: o plasma rico em plaquetas é definido como um concentrado de plaquetas autólogas, obtido por centrifugação de sangue total. Trata-se de uma técnica inovadora, simples e de baixo custo, que apresenta muitos benefícios, podendo ser aplicada em diferentes áreas da saúde. Objetivo: a presente pesquisa buscou desenvolver um protocolo operacional padrão para obtenção e aplicação do plasma sanguíneo rico em plaquetas para o tratamento de alterações estéticas faciais. Metodologia: o estudo tratou de uma pesquisa de campo experimental, de caráter qualitativo e quantitativo. Um processo seletivo foi realizado para recrutar pacientes voluntários para o estudo, que foram selecionados de acordo com os critérios de inclusão e exclusão. Através de testes foi possível chegar ao tempo de centrifugação e velocidade ideais para a produção do plasma rico em plaquetas e testá-lo no tratamento de alterações estéticas faciais. Resultados e discussão: as principais mudanças que foram notadas pelos pacientes durante e após o tratamento foram a redução das cicatrizes de acne e aumento da hidratação e viscosidade da pele. A melhora das alterações estéticas tratadas foi notada por 100% dos pacientes, não havendo piora em nenhum paciente. Conclusão: com base nos testes e resultados obtidos, foi possível padronizar um protocolo operacional padrão ideal para a obtenção e aplicação do plasma rico em plaquetas, comprovando sua eficácia no tratamento de alterações estéticas faciais como rugas, flacidez, linhas de expressões acentuadas, acne, cicatrizes de acne, além de ter-se observado uma melhora significativa na hidratação da pele e redução de poros dilatados.

Introduction: platelet-rich plasma is defined as a concentrate of autologous platelets, obtained by centrifuging whole blood. It is an innovative, simple and low-cost technique that has many benefits, and can be applied in different areas of health. Objective: the present research sought to develop a standard operating protocol for obtaining and applying platelet-rich blood plasma for the treatment of facial aesthetic changes. Metodology: the study was a qualitative and quantitative field research. A selection process was carried out to recruit volunteer patients for the study, who were selected according to the inclusion and exclusion criteria. Through tests it was possible to reach the ideal centrifugation time and speed for the production of platelet-rich plasma and to test it in the treatment of facial aesthetic changes. Results and discussion: the main changes that were noted by patients during and after treatment were the reduction of acne scars and increased hydration and skin viscosity. The improvement of the aesthetic changes treated was noticed by 100% of the patients, with no worsening in any patient. Conclusion: based on the tests and results obtained, it was possible to standardize an ideal standard operating protocol for obtaining and applying platelet-rich plasma, proving its effectiveness in the treatment of facial aesthetic changes such as wrinkles, sagging, accentuated expression lines, acne, scars from acne, in addition to a significant improvement in skin hydration and reduction of enlarged pores.

Allogenic platelet-rich plasma in induced ulcers in rat's cornea / [Plasma rico em plaquetas alogênico em úlceras de córnea induzidas em ratos]

The objective in this study was to evaluate the clinic effect of applying allogenic platelet-rich plasma (PRP) heated or not, for treating cornea ulcers, including the dosage of PDGF-BB in the cornea. The ulcers were induced, standardizing the left eye from 81 rats (Ratus norvegicus, albinus variety), assigned randomly into three groups (N=27): control group (CG) which did not receive any topic treatment; heated PRP group (GA) and PRP group (GP), which received topical treatment every eight hours for five days. Each group underwent evaluation at 24 hours (M1), three days (M3) and five days (M5). The clinical exam evaluated the opacity, vascularization and corneal repair. The corneal PDGF-BB was dosed through the ELISA method. The corneal opacity was decreased in PRP-treated animals (GA and GP) and corneal repair time reduced when compared to CG at M1 and M5. Furthermore, GP showed greater vascularization at M3 compared to M1. Applied allogenic PRP eye drops, heated or not, speed up corneal healing, and reduce corneal repair time. However, the corneal PDGF concentration was not altered in any of the treatments.(AU)

Objetivou-se avaliar o efeito clínico da aplicação de plasma rico em plaquetas alogênico (PRP) aquecido ou não, no tratamento de úlceras de córnea, como a dosagem de PDGF-BB na córnea. As úlceras foram induzidas, padronizando-se o olho esquerdo de 81 ratos (Rattus norvegicus, variedade albinus), aleatoriamente, nos três grupos (N = 27): grupo controle (CG), que não recebeu nenhum tratamento tópico; grupo PRP aquecido (GA) e grupo PRP (GP), que receberam tratamento tópico a cada oito horas, durante cinco dias. Cada grupo foi subdividido em 24 horas (M1), três dias (M3) e cinco dias (M5). O exame clínico avaliou a opacidade, a vascularização e o reparo corneano. O PDGF-BB corneano foi dosado pelo método Elisa. Houve diminuição da opacidade da córnea nos animais tratados com PRP (GA e GP) e diminuição do tempo de reparo da córnea em comparação com CG, M1 e M5. Além disso, foi observada maior vascularização no GP no momento M3 em relação ao M1. A aplicação de colírios de PRP alogênico, aquecidos ou não, acelera a cicatrização da córnea, além de reduzir o tempo de reparo da córnea. No entanto, a concentração de PDGF na córnea não se alterou em nenhum dos tratamentos.(AU)

Effects of photobiomodulation therapy on functional recovery, angiogenesis and redox status in denervated muscle of rats / Efeitos da terapia de fotobiomodulação na recuperação funcional, na angiogênese e no estado redox em músculo desnervado de ratos

ABSTRACT Objective: To evaluate the effects of photobiomodulation therapy in redox status, angiogenesis marker - vascular endothelial growth factor - and in the functional recovery in denervated muscle. Methods: A total of 32 female Wistar rats underwent a crush injury and were randomly divided into four groups: Light Emitting Diode Group 2 and Control Group 2 (muscle collected 2 days after injury), and Light Emitting Diode Group 21 and Control Group 21 (muscle collected 21 days afterinjury). Light Emitting Diode Group 2 and Light Emitting Diode Group 21 received two and ten light emitting diode applications (630±20nm, 9J/cm2, 300mW), respectively, and the Control Group 2 and Control Group 21 did not receive any treatment. The function was evaluated by grasping test at four moments (pre-injury, 2, 10 and 21 post-injury days). The flexor digitorum muscle was collected for analysis of immunolocalization of vascular endothelial growth factor and redox parameters. Results: Functional improvement was observed at the second and tenth post-injury day in treated groups compared to control (p<0.005). The muscle tissue of treated groups presented higher immunohistochemical expression of vascular endothelial growth factor. Photobiomodulation therapy decreased the oxidative damage to lipid in Light Emitting Diode Group 2 compared to Control Group 2 (p=0.023) in the denervated muscle. Conclusion: Photobiomodulation therapy accelerated the functional recovery, increased angiogenesis and reduced lipid peroxidation in the denervated muscle at 2 days after injury.

RESUMO Objetivo: Avaliar os efeitos da terapia de fotobiomodulação no estado redox, no marcador de angiogênese - fator de crescimento endotelial vascular - e na recuperação funcional do músculo desnervado. Métodos: Um total de 32 ratas Wistar foi submetido a uma lesão por esmagamento e dividido aleatoriamente em quatro grupos: Grupo Diodo Emissor de Luz 2 e Grupo Controle 2 (músculo coletado 2 dias após a lesão), além do Grupo Diodo Emissor de Luz 21 e do Grupo Controle 21 (músculo coletado 21 dias após a lesão). Grupo Diodo Emissor de Luz 2 e Grupo Diodo Emissor de Luz 21 receberam duas e dez aplicações de diodo emissor de luz (630±20nm, 9J/cm2e 300mW), respectivamente, e Grupo Controle 2 e Grupo Controle 21 não receberam tratamento. A função foi avaliada pelo teste de preensão em quatro momentos (pré-lesão, 2, 10 e 21 dias após a lesão). O músculo flexor dos dedos foi coletado para análise dos parâmetros redox e da imunolocalização do fator de crescimento endotelial vascular. Resultados: Houve melhora funcional no segundo e décimo dia pós-lesão nos grupos tratados em comparação aos controles (p<0,005). O tecido muscular dos grupos tratados apresentou maior expressão imuno-histoquímica do fator de crescimento endotelial vascular. A terapia de fotobiomodulação diminuiu o dano oxidativo aos lipídeos no Grupo Diodo Emissor de Luz 2 comparado ao Grupo Controle 2 (p=0,023) no músculo desnervado. Conclusão: A terapia de fotobiomodulação acelerou a recuperação funcional, aumentou a angiogênese e reduziu a peroxidação lipídica no músculo desnervado 2 dias após a lesão.

Association between fibroblast growth factor 23 and functional capacity among independent elderly individuals / Associação entre fator de crescimento de fibroblastos 23 e capacidade funcional em idosos independentes

ABSTRACT Objective To examine the association of between serum fibroblast growth factor 23 and the functional capacity among independent individuals, aged 80 or older. Methods The functional capacity of 144 elderly was assessed by Instrumental Activities of Daily Living, cognitive tests, handgrip strength and the timed ability to rise from a chair and sit down five times. Fibroblast growth factor 23 was measured using an ELISA assay. Results Participants in the lowest fibroblast growth factor 23 tertile had the highest mean±standard deviation estimated glomerular filtration rate, the highest mean hemoglobin level, the lowest average number of diseases and the lowest number of medications used. In participants with the estimated glomerular filtration rate >45mL/minute/1.73m2, mean fibroblast growth factor 23 level was higher in those with 25(OH) vitamin D <20ng/mL than in those with 25(OH) vitamin D ≥20ng/mL (75.6RU/mL±42.8 versus 68.5RU/mL±41.7; p<0.001). There was an increase in the mean serum cystatin C (from 1.3mg/mL±0.3 to 1.5mg/mL±0.3 to 1.7mg/mL±0.4) as function of higher fibroblast growth factor 23 tertile (p<0.001). Fibroblast growth factor 23 levels were not significantly associated with capacity in physical or cognitive tests. Conclusion In independent community-dwelling elderly, aged ≥80 years, fibroblast growth factor 23 was associated with aged-related comorbidities and renal function but not with functional capacity.

RESUMO Objetivo Examinar a associação entre o fator de crescimento de fibroblastos 23 sérico e a capacidade funcional em indivíduos independentes, com 80 anos ou mais. Métodos A capacidade funcional de 144 idosos foi avaliada por meio de Atividades Instrumentais da Vida Diária, testes cognitivos, força de preensão manual e capacidade de levantar de uma cadeira e sentar cinco vezes. O fator de crescimento de fibroblastos 23 foi medido pelo teste ELISA. Resultados Os participantes no tercil mais baixo de fator de crescimento de fibroblastos 23 tiveram a maior média±desvio-padrão da taxa de filtração glomerular estimada, concentração média de hemoglobina mais alta, menor número médio de doenças e menor número de medicamentos utilizados. Em participantes com taxa de filtração glomerular estimada >45mL/minuto/1,73m2, o nível médio do fator de crescimento de fibroblastos 23 foi maior naqueles com 25(OH) vitamina D <20ng/mL do que naqueles com 25(OH) vitamina D ≥20ng/mL (75,6RU/mL±42,8 versus 68,5RU/mL±41,7; p<0,001). Houve aumento na cistatina C sérica média (de 1,3mg/mL±0,3 a 1,5mg/mL±0,3 a 1,7mg/mL±0,4) em função do tercil de fator de crescimento 23 de fibroblastos mais alto (p<0,001). Os níveis de fator de crescimento de fibroblastos 23 não foram significativamente associados à capacidade em testes físicos ou cognitivos. Conclusão Em idosos independentes residentes na comunidade ≥80 anos, o fator de crescimento de fibroblastos 23 foi associado a comorbidades relacionadas à idade e à função renal, mas não à capacidade funcional.

Influência do uso combinado do EDTA em procedimento endodôntico regenerativo: estudo experimental em modelo animal e revisão sistemática / Influence of combined use of EDTA in regenerative endodontic procedure: animal study and systematic review

Os objetivos deste estudo foram: 1. Verificar a influência do uso do ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) no processo de reparo após revascularização pulpar em molares imaturos de ratos, avaliando a formação de tecido mineralizado, presença de infiltrado inflamatório, e presença/maturação de fibras colágenas; 2. Verificar a influência do uso do EDTA na presença de fatores de crescimento após revascularização pulpar em molares imaturos de ratos, avaliando a imunomarcação do fator de transformação do crescimento (TGF)-ß1 e fator de crescimento de fibroblastos (FGF)-2; 3. Verificar a influência do uso do EDTA em fatores relacionados ao procedimento endodôntico regenerativo, por meio de revisão sistemática. Para as análises experimentais, molares inferiores direito ou esquerdo de 12 ratos Wistar (4 semanas) tiveram as polpas removidas, e foram divididos aleatoriamente nos grupos (n = 6): NaOCl - irrigação com hipoclorito de sódio (NaOCl) 2,5%; e NaOCl-EDTA ­ NaOCl 2,5%, seguido de EDTA 17%. Após, foi induzido o sangramento intracanal por sobreinstrumentação com lima K #15 e os dentes foram selados. Molares inferiores que não receberam intervenção destes animais, foram aleatoriamente selecionados como controle (controle-15d; n = 3). Outros molares inferiores direito ou esquerdo de três animais que não receberam qualquer intervenção, foram utilizados como controle-imediato (n = 3). Após 15 dias, os animais dos grupos experimentais e controle-15d foram eutanasiados; animais do grupo controle-imediato foram eutanasiados imediatamente no dia da experimentação. As peças foram preparadas para análise histológica (hematoxilinaeosina), análise do colágeno (picrosírius red e Tricrômio de Masson), e imunohistoquímica (TGF-ß1 e FGF-2). Os resultados foram submetidos a testes estatísticos específicos (p<0,05). Para a revisão sistemática, dois autores independentes conduziram busca em bases de dados eletrônicas (até fevereiro2021), extração dos dados e avaliação do risco de viés. Análise dos fatores de crescimento foi considerada desfecho primário. Em relação à formação de tecido mineralizado, o grupo NaOCl-EDTA teve mais espécimes com aumento concomitante da espessura e comprimento da raiz, apesar de todos espécimes dos grupos experimentais mostrarem presença de cemento neoformado; no entanto, houve fechamento parcial do forame apical em NaOCl e completo em NaOCl-EDTA, em alguns espécimes. A maioria dos espécimes dos grupos experimentais apresentaram infiltrado inflamatório até o terço médio do canal radicular. Foi observada maior neoformação tecidual nos espécimes do NaOCl-EDTA (p<0,05). Em relação ao colágeno, apesar do grupo NaOCl-EDTA apresentar maior quantidade de colágeno na extremidade radicular, não houve diferença significativa com o grupo EDTA, e ambos apresentaram maior quantidade de fibras imaturas nessa região; no centro do terço apical do canal radicular, houve equivalência de fibras maduras e imaturas nos grupos, sem diferença significativa. Houve significativa imunomarcação de TGF-ß1 no grupo NaOCl-EDTA comparado ao NaOCl (p<0,05), mas não houve diferença na imunomarcação de FGF-2. Conclui-se que: 1. EDTA influenciou positivamente a presença de tecido neoformado nos canais radiculares após revascularização pulpar, mas não influenciou na maturação colágena; 2. EDTA influencia a imunomarcação de TGF-ß1, mas não de FGF-2; 3. A revisão sistemática revelou que o EDTA pode aumentar a liberação de TGF-ß da dentina, além da migração, adesão e diferenciação celular.

The objectives of this study were: 1. To evaluate the influence of the use of ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) in the repair process after pulp revascularization in immature rat molars, by evaluating mineralized tissue formation, presence of inflammatory infiltrate, and the presence/maturation of collagen fibers; 2. To evaluate the influence of EDTA in the presence of growth factors after pulp revascularization in immature molars of rats, by analyzing the immunolabelling of transforming growth factor (TGF)-ß1 and fibroblast growth factor (FGF)-2; 3. To evaluate the influence of the use of EDTA on the factors associated with the regenerative endodontic procedure, through a systematic review. For experimental analyses, lower right or left molars of 12 Wistar rats (4-week-old) had pulp tissue removed, and they were randomly separated in the groups (n = 6): NaOCl - irrigation with 2.5% NaOCl; and NaOCl-EDTA - 2.5% NaOCl followed by 17% EDTA. Afterwards, blood clot was induced by inserting a 15 K-file beyond the apex, and teeth were sealed. Lower untreated molars from these animals were randomly selected as control (control-15d; n = 3). Other lower right or left molars of other three animals that did not receive any intervention, they were used as control-immediate (n = 3). After 15 days, the rats from the experimental and the control-15d groups were killed; animals from control-immediate group were killed immediately at the experimental period. The jaws were prepared for histological (haematoxylin-eosin); collagen analysis (picrosirius red and Masson's trichrome); and immunohistochemical analyses (TGF-ß1 and FGF-2). Data were submitted to statistical tests (p<0.05). For systematic review, two authors independently performed a search in electronic databases (up to February-2021), data extraction and risk of bias evaluation. The release of growth factors was the primary outcome. Regarding mineralized tissue formation, NaOCl-EDTA group had more specimens with a concomitant increase in root thickness and length, and all specimens from the experimental groups showed neoformed cementum-like tissue; however, some specimens of NaOCl showed partial apical closure, while NaOCl-EDTA had complete apical closure. Most specimens from the experimental groups had inflammatory infiltrate extending to the middle third of root canals. A significant tissue neoformation was observed in the NaOCl-EDTA specimens (p<0.05). For collagen, the NaOClEDTA group showed more collagen fibers in the root tip, without significant difference compared to NaOCl group, where both groups showed greater amount of immature fibers in this region; in the center of the apical third, there was similar amount of mature and immature fibers from both groups, without significant differences. There was significant TGF-ß1 immunolabeling in the NaOCl-EDTA group compared to NaOCl group (p<0,05), but there was no significant difference in FGF-2 immunolabeling. In conclusion: 1. EDTA positively influenced the presence of newly formed tissue in root canals after pulp revascularization, but it did not influence collagen maturation; 2. EDTA influenced TGF-ß1 immunolabeling, but it did not influence FGF-2; 3. The systematic review showed that the use of EDTA can enhance TGF-ß release from dentin, in addition to increase cell migration, adherence and differentiation.

Three versus five intravitreal aflibercept injections as the initial loading phase in the treatment of diabetic macular edema: one-year results / Três versus cinco injeções intravítreas de aflibercept como carga inicial do tratamento de edema macular diabético: resultados de um ano

ABSTRACT Purpose: To compare the efficacy of three initial monthly intravitreal aflibercept injections followed by pro re nata (3+PRN) dosing versus five initial monthly intravitreal aflibercept injections followed by pro re nata (5+PRN) dosing in patients with diabetic macular edema. Methods: A total of 60 treatment-naïve patients with macular edema who underwent intravitreal aflibercept injections (2 mg/0.05 mL) with at least one year of follow-up were analyzed in this retrospective and comparative study. The patients were divided into two groups according to the number of intravitreal aflibercept injections administered in the loading phase. The 3+PRN group comprised 27 patients, whereas the 5+PRN group comprised 33 patients. The visual and anatomical outcomes were compared between the two groups at baseline and at 3, 6, 9, and 12 months. Results: Both 3+PRN and 5+PRN, showed statistically significant improvements in the best-corrected visual acuity and central macular thicknesse throughout the study period (p<0.001 and, p<0.001, respectively). There were no significant differences between the two groups in terms of changes in the best-corrected visual acuity and central macular thickness (p=0.453 and, p=0.784, respectively). The mean number of intravitreal aflibercept injections was significantly greater in the 5+PRN group (6.1 ± 0.8) than in the 3+PRN group (3.9 ± 0.8) (p<0.001). Conclusion: The 3+PRN and 5+PRN regimens showed similar 12-month visual and anatomical outcomes following treatment with intravitreal aflibercept injections in patients with macular edema.

RESUMO Objetivo: Comparar a eficácia de três injeções intravítreas mensais iniciais de aflibercept, seguidas de dosagem de pro re nata (3+PRN) versus cinco injeções mensais iniciais intravítreas de aflibercept, seguidas de doses de pro re nata (5 + PRN) em pacientes com edema macular diabético. Métodos: Foram analisados neste estudo retrospectivo e comparativo 60 pacientes que não receberam tratamento prévio com edema macular e foram submetidos a injeções intravítreas de aflibercept (2 mg/0,05 mL) com pelo menos um ano de acompanhamento. Os pacientes foram divididos em dois grupos de acordo com o número de injeções intravítreas de aflibercept administradas na fase inicial. O grupo 3+PRN compreendeu 27 pacientes, enquanto o grupo 5+PRN compreendeu 33 pacientes. Os resultados visuais e anatômicos foram comparados entre os dois grupos no período inicial e aos 3, 6, 9 e 12 meses. Resultados: Tanto os grupos 3+PRN quanto 5+PRN mostraram melhoras estatisticamente significativas na acuidade visual melhor corrigida e na espessura macular central ao longo do período de estudo (p<0,001 e p <0,001, respectivamente). Não houve diferenças significativas entre os dois grupos em termos de alterações na acuidade visual melhor corrigida e na espessura macular central (p=0,453 e p=0,784, respectivamente). O número médio de injeções intravítreas de aflibercept foi significativamente maior no grupo 5+PRN (6,1 ± 0,8) do que no grupo 3+PRN (3,9 ± 0,8) (p <0,001). Conclusão: Os regimes 3+PRN e 5+PRN mostraram resultados visuais e anatômicos semelhantes em 12 meses após o tratamento com injeções intravítreas de aflibercept em pacientes com edema macular.

Níveis Séricos do BDNF na Proteção Cardiovascular e em Resposta ao Exercício / Serum Levels of BDNF in Cardiovascular Protection and in Response to Exercise

Resumo As doenças cardiovasculares (DCV) são atualmente a maior causa de morte no Brasil e no mundo. Em 2016 as DCV foram responsáveis por mais de 17 milhões de mortes, representando 31% de todas as mortes em nível global. Mecanismos moleculares e genéticos podem estar envolvidos na proteção cardiovascular e devem ser considerados nas novas abordagens terapêuticas. Nesse sentido, recentes estudos têm relatado que o Fator Neurotrófico Derivado do Encéfalo (Brain-Derived Neurotrophic Factor, BDNF) está reduzido em indivíduos predispostos a desenvolverem DCV, e que o treinamento físico aeróbio aumenta as quantidades de BDNF circulante. O BDNF é uma neurotrofina encontrada em altas concentrações no hipocampo e córtex cerebral, sendo considerada molécula-chave na manutenção da plasticidade sináptica e na sobrevivência das células neuronais. Além da plasticidade neuronal, BDNF também é importante na função vascular, promovendo angiogênese por meio da regulação por espécies reativas de oxigênio (ROS). Entretanto, uma variante do gene do BDNF em humanos, o polimorfismo Val66Met (substituição do aminoácido valina por uma metionina na posição 66 do códon), que ocorre em 20-30% da população caucasiana, pode afetar as concentrações de BDNF no plasma e sua atividade em todos os tecidos periféricos contendo receptores tirosina quinase B (TrkB), como o endotélio. De fato, recentemente observamos que o polimorfismo Val66Met prejudica a reatividade vascular e o BDNF circulante em resposta ao treinamento físico. Dessa forma, apresentaremos a seguir uma discussão sobre os níveis séricos de BDNF na proteção cardiovascular, a variante genética Val66Met na reatividade vascular e o efeito do exercício físico.

Abstract Cardiovascular disease (CVD) is currently the leading cause of death in Brazil and worldwide. In 2016, CVD accounted for more than 17 million deaths, representing 31% of all deaths globally. Molecular and genetic mechanisms may be involved in vascular protection and should be considered in new therapeutic approaches. In this sense, recent studies have reported that brain-derived neurotrophic factor (BDNF) is reduced in individuals predisposed to develop CVD, and that aerobic physical training increases the amounts of circulating BDNF. BDNF is a neurotrophin found at high concentrations in the hippocampus and cerebral cortex and is considered a key molecule for the maintenance of synaptic plasticity and survival of neuronal cells. In addition to neuronal plasticity, BDNF is also important in vascular function, promoting angiogenesis through the regulation of reactive oxygen species (ROS). However, a variant of the BDNF gene in humans, the Val66Met polymorphism (substitution of the amino acid valine for a methionine at position 66 of the codon), occurring in 20-30% of the Caucasian population, may affect plasma BDNF concentrations and its activity in all peripheral tissues containing tyrosine kinase B receptors (TrkB), such as the endothelium. Thus, we will present a discussion about the role of serum BDNF levels in cardiovascular protection, Val66Met genetic variant in vascular reactivity and the effect of physical exercise.

Evaluation of platelet-rich plasma gel as an angiogenesis-inducing agent in canine advancement skin flaps / Avaliação do gel de plasma rico em plaquetas como agente indutor da angiogênese em flapes cutâneos de avanço em cães

This work aimed to evaluate the effect of platelet-rich plasma (PRP) on advancement skin flaps in dogs regarding improvement of vascularization, with focus on increasing its viable area, since there are reports that it is a potential angiogenesis stimulator. The experimental group was composed of eight adult bitches, in which two advancement skin flaps were made in the ventral abdominal region. No product was applied in the control flap (CF), while PRP was used in the contralateral flap, called treated flap (TF). The areas were clinically evaluated every two days until the 7th postoperative day regarding skin color and presence of necrosis. At 10 days, both flaps were removed and submitted to histological examination and blood vessel morphometry. The vessels counted in each group were statistically analyzed by the F-test at 1% probability. Results showed no significant difference in macroscopic changes in the wound, or CF and TF vascularization, thus suggesting that PRP gel did not improve advancement skin flap angiogenesis in bitches under the experimental conditions in which this research was developed.(AU)

Objetivou-se com o presente artigo avaliar a ação angiogênica do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes cutâneos de avanço em animais da espécie canina, visando aumentar a viabilidade da pele após o procedimento, uma vez que existem relatos de que o produto é um potente estimulador da angiogênese. O grupo experimental foi composto por oito cadelas adultas, onde foram confeccionados dois flapes de avanço (de padrão subdérmico) na região abdominal ventral. Em um dos flapes, considerado controle (FC) não foi aplicado nenhum produto, enquanto que no flape contralateral, denominado tratado (FT), foi usado o gel de PRP. As áreas foram macroscopicamente avaliadas a cada dois dias até o 7º dia de pós-operatório em relação à coloração da pele e presença de área de necrose, e com 10 dias ambos os flapes foram coletados por biópsia e submetidos ao exame histológico e morfometria dos vasos sanguíneos. Os vasos contados em cada grupo foram estatisticamente analisados pelo teste de F ao nível de 1% de probabilidades. Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa nas alterações macroscópicas das feridas e na morfometria vascular dos FC e FT, sugerindo dessa maneira que dentro das condições experimentais nas quais a pesquisa foi executada, que o gel de PRP não incrementou a angiogênese de flapes de avanço em cadelas.(AU)

Survey among retina specialists in Brazil about inflammatory reactions after intravitreal antiangiogenic therapy / Levantamento entre especialistas em retina no Brasil sobre reações inflamatórias após terapia antiangiogênica intravítrea

ABSTRACT Purpose: This survey aimed at assessing the clinical characteristics of patients with inflammatory reactions after intravitreal injection of antiangiogenic agents and the techniques employed by Brazilian retina specialists. Methods: We sent an 18-item questionnaire electronically to retina specialists who are using antiangiogenic agents. We got the responses between September 21 and December 23, 2018. Results: A total of 58 retina specialists participated. Most of them were from Southeastern Brazil (50%), 82.8% were dedicated to both medical and surgical practices, and 86.2% had practiced for more than 5 years. Respondents reported a mean number of 2.14 ± 1.63 patients with inflammation, 44.8% with panuveitis, and 79.3% with onset of symptoms within 72 h. Specialists used aflibercept (53.4%), bevacizumab (29.3%), and ranibizumab (27.6%). Most patients were treated with steroid drops (70.7%), and their inflammation subsided after 11.5 ± 11.5 days (86.2% lacked irreversible complications). The specialists blamed the syringe as the cause of the inflammation in 25.9% of the cases, 41.4% used Becton-Dickinson Ultra-Fine syringes, 43.1% injected the drug at room temperature, and 37.9% removed the air (53.4% by flicking the syringe). Most specialists did not detect silicone oil (67.2%), but 17.2% of them performed vitrectomies to remove vitreous opacities. Finally, 44.8% of specialists injected the same antiangiogenic agent in an eye with prior inflammatory reaction without further inflammation. Conclusions: Most specialists reported cases of early-onset inflammation after intravitreal injection of antiangiogenic agents. The incidence of irreversible complications was low. Aflibercept was the most common agent used. The causes of inflammation remain unknown, but we formulated some relevant hypotheses.

RESUMO Objetivo: Esta pesquisa teve como objetivo avaliar as características clínicas de pacientes com reações inflamatórias após injeção intravítrea de agentes antiangiogênicos e as técnicas empregadas por especialistas em retina brasileiros. Métodos: Enviamos eletronicamente um questionário de 18 itens para especialistas em retina que usam agentes antiangiogênicos. Recebemos as respostas entre 21 de setembro e 23 de dezembro de 2018. Resultados: Um total de 58 especialistas em retina participaram. A maioria era do Sudeste do Brasil (50%), 82,8% eram dedicados a práticas médicas e cirúrgicas e 86,2% praticavam há mais de 5 anos. Os entrevistados informaram um número médio de 2,14 ± 1,63 pacientes com inflamação, 44,8% com panuveíte e 79,3% com início dos sintomas dentro de 72 horas. Especialistas utilizaram aflibercepte (53,4%), bevacizumabe (29,3%) e ranibizumabe (26=7,6%). A maioria dos pacientes foi tratada com colírios de esteroides (70,7%), e sua inflamação diminuiu após 11,5 ± 11,5 dias (86,2% não apresentaram complicações irreversíveis). Os especialistas responsabilizaram a seringa como causa da inflamação em 25,9% dos casos, 41,4% usaram seringas Becton-Dickinson Ultra-Fine, 43,1% injetaram a droga em temperatura ambiente e 37,9% removeram o ar (53,4% sacudindo a seringa). A maioria dos especialistas não detectou óleo de silicone (67,2%), mas 17,2% realizaram vitrectomias para remoção de opacidades vítreas. Finalmente, 44,8% dos especialistas injetaram o mesmo agente angiogênicos em um olho com reação inflamatória prévia, sem surgimento de nova inflamação. Conclusões: A maioria dos especialistas relatou casos de inflamação de início precoce após injeção intravítrea de agentes antiangiogênicos. A incidência complicações irreversíveis foi baixa. Aflibercepte foi o agente mais frequentemente usado. As causas da inflamação permanecem desconhecidas, embora formulamos algumas hipóteses relevantes.

Optical coherence tomography angiography findings in patients with branch retinal vein occlusion treated with Anti-VEGF / Achados de angiografia por tomografia de coerência óptica em pacientes com oclusão de ramo da veia retiniana tratada com anti-VEGF

ABSTRACT Purpose: To investigate retinal microvasculature changes in patients treated with anti-VEGF for macular edema secondary to branch retinal vein occlusion. Methods: We examined 38 eyes of 19 patients for the study. We measured superficial and deep capillary plexus vessel densities (%), foveal avascular zone areas (mm2), and central macular thicknesses. Results: Parafoveal superficial and deep capillary plexus values were significantly lower in eyes with branch retinal vein occlusion than in fellow eyes (p<0.001). We found a significant increase in parafoveal deep capillary plexus values after the anti-VEGF treatment (p=0.032). The mean foveal avascular zone was larger in eyes with branch retinal vein occlusion than in control eyes (p<0.001). The mean central macular thickness was significantly higher in eyes with branch retinal vein occlusion than in controls, and we observed a significant decrease in central macular thickness after anti-VEGF treatment (<0.001). In addition, the cystic structures in the deep capillary plexus regressed. Conclusion: Optical coherence tomography angiography enables qualitative and quantitative evaluations during follow-up of patients treated for branch retinal vein occlusion.

RESUMO Objetivo: Investigar as alterações na microvascu latura da retina em pacientes tratados com anti-VEGF para ede ma macular secundário à oclusão de ramo da veia retiniana. Métodos: Foram examinados 38 olhos de 19 pacientes para o estudo. Medimos as densidades dos vasos do plexo capilar superficial e profunda (%), áreas da zona avascular foveal (mm2) e espessura macular central. Resultados: Os valores do plexo capilar superficial e profundo parafoveal foram significativamente menores nos olhos com oclusão de ramo da veia retiniana do que nos outros olhos (p<0,001). Encontramos um aumento significativo nos valores de plexo capilar profundo parafoveal após o tratamento com anti-VEGF (p=0,032). A zona avascular foveal média foi maior nos olhos com oclusão de ramo da veia retiniana do que nos olhos controle (p<0,001). A espessura macular central média foi significativamente maior nos olhos com oclusão de ramo da veia retiniana do que nos controles, e observamos uma diminuição significativa na espessura macular central após o tratamento com anti-VEGF (< 0,001). Além disso, as estruturas císticas no plexo capilar profundo regrediram. Conclusão: A angiotomografia de coerência óptica permite avaliações qualitativas e quantitativas durante o acompanhamento de pacientes tratados por oclusão de ramo da veia retiniana.

Avaliação da expressão imuno-histoquímica de NGF e TrkA durante o envelhecimento de glândulas salivares sublinguais humanas

Saliva plays an important role in swallowing, chewing and speaking, and is essential for maintaining proper oral health. The aging process leaves to decrease of saliva production causing a condition called xerostomia, which is a big problem for the elderly. Literature shows that during aging the parenchyma of the salivary glands is replaced by fat and connective tissue. Neural growth factor NGF and NGF receptor TrkA are synthesized and secreted by salivary glands SG; however, the physiological role of these proteins in saliva and maintenance of SG has not been fully elucidated. The aim of this study was evaluate alterations in NGF and TrkA expression in sublingual SG SL during the aging process. The cases were divided into two groups for comparison: adult group, individuals between 30 and 60 years old; and elderly group, individuals over 60 years. NGF and TrkA expression were evaluated by immunohistochemistry. Quantitative analysis was measured by Image J software, Mann Whitney”s Test and Pearson’s Correlation Test. Qualitative data were analyzed by Fisher's Exact Test. Analyzing the SL samples, we observed that NGF expression occurred in serous, mucous and ducts cells. The NGF expression in serous acini was diffuse, granular and cytoplasmatic. In both striated and excretory ducts, NGF was quite expressed in the cytoplasm and had a more diffuse than granular pattern. The NGF expression in mucosal cells was smaller and was predominantly in the cytoplasm, the staining pattern was both diffuse and granular. Fisher's Exact Test showed that there was higher labeling in striatal and excretory duct cell cytoplasm in the adult group compared to the elderly one p 0,037. In addition, the granular expression was higher in the striatal duct cells of adults compared to the elderly p 0,043. Mann Whitney's test demonstrated that there was no difference in NGF expression in the adult group compared to the elderly one p≥0.05. Pearson’s correlation test did not show linear correlation between age and expression of NGF. The TrkA expression was more expressive in mucosal acini and ducts. In mucous cells, TrkA was expressed in the cytoplasm and in peribasal portion diffusely and granularly. In ductal cells, TrkA was expressed in almost all cases and the pattern was citoplasmatic and granular. In serous acini, the labeling was predominant cytoplasmatic and diffuse. Fisher's Exact Test showed that the granular labeling of striated duct cells was higher in the elderly group than in the adult one p 0,03. In contrast, the diffuse pattern was higher in striated duct cell of the adults if compared with the elderly p 0,008. Mann Whitney's test demonstrated that there was no difference in TrkA expression in the adult group compared to the elderly one p0.05. Pearson’s correlation test did not show linear correlation between age and expression of TrkA.

A saliva desempenha um papel importante na deglutição, mastigação e fala, e é essencial para manter a saúde bucal adequada. O processo de envelhecimento diminui a produção de saliva, causando uma condição chamada xerostomia, que é um grande problema para os idosos. A literatura mostra que durante o envelhecimento, o parênquima das glândulas salivares é substituído por gordura e tecido conjuntivo. O fator de crescimento neural (NGF) e o receptor para NGF (TrkA) são sintetizados e secretados pelas glândulas salivares (GS); no entanto, o papel fisiológico dessas proteínas na saliva e na manutenção das GS não foi totalmente elucidado. O objetivo deste estudo foi avaliar alterações na expressão de NGF e TrkA na GS sublingual (SL) durante o processo de envelhecimento. Os casos foram divididos em dois grupos para comparação: grupo de adultos, indivíduos entre 30 e 60 anos; e grupo de idosos, indivíduos acima de 60 anos. A expressão de NGF e TrkA foi avaliada por imunoistoquímica. A análise quantitativa foi mensurada pelo software Image J, pelo teste de Mann Whitney e pelo teste de correlação de Pearson. Os dados qualitativos foram analisados pelo teste exato de Fisher. Analisando as amostras de SL, observamos que a expressão de NGF ocorreu principalmente nas células serosas, nas células mucosas e nos ductos. A expressão de NGF nos ácinos serosos foi difusa, granular e citoplasmática. Nos ductos estriado e excretor, o NGF foi bastante expresso no citoplasma e apresentava um padrão mais difuso do que granular. A expressão de NGF nas células da mucosa foi menor quando comparada com as células serosas e ductais e predominantemente no citoplasma, o padrão de coloração foi difuso e granular. O teste exato de Fisher mostrou que houve maior número de casos marcados, no citoplasma dos ductos excretor e estriado, no grupo adulto em comparação com o idoso (p=0,037). Além disso, a expressão granular foi maior nas células do ducto estriado de adultos em comparação com os idosos (p=0,043). O teste de Mann Whitney demonstrou que não houve diferença na expressão de NGF no grupo adulto comparado ao grupo idoso (p≥0,05) e o teste de Correlação de Pearson, mostrou que não houve correlação linear entre a idade dos indivíduos e a expressão do NGF. A expressão de TrkA foi mais expressiva nos ácinos mucosos e nos ductos. Nas células mucosas, o TrkA foi expresso no citoplasma e na porção peribasal de forma difusa e granular. Nas células ductais, oTrkA foi expresso em quase todos os casos e o padrão foi citoplasmático e granular. Nos ácinos serosos, a marcação foi predominantemente citoplasmática e difusa. O teste exato de Fisher mostrou que a marcação granular das células do ducto estriado era maior no grupo de idosos do que no grupo de adultos (p=0,033). Por outro lado, o padrão difuso foi maior nas células do ducto estriado dos adultos se comparado aos idosos (p= 0,008). O teste de Mann Whitney demonstrou que não houve diferença na expressão de TrkA no grupo adulto comparado ao grupo idoso (p≥0,05) e o teste de Correlação de Pearson, mostrou que não houve correlação linear entre a idade dos indivíduos e a expressão do TrkA.

Comparison of the protocols for obtaining platelet-rich plasma in dogs: a cellular study / Comparação entre protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas em cães: estudo celular

ABSTRACT: This study aimed to evaluate two protocols (PA and PB) that are used to obtain canine platelet-rich plasma (PRP) for cellularity. Twenty healthy dogs were used. Blood samples were collected and placed in two tubes of 3.2% sodium citrate. PA used double centrifugation at 210 x g, and 370 x g and PB used double centrifugation with 140 x g and 330 x g. The PRP samples from the protocols were examined in terms of their platelet, erythrocyte, and leukocyte count in the Neubauer chamber, differential leukocyte count and platelet morphological observation in blood smears. Data (mean and standard deviation) were analyzed with the 95% probability t-test (P <0.05) using Pearson's correlation to test the relationship between platelets and erythrocytes, platelets, and leukocytes, and the leukocyte count versus the erythrocytes. Very weak negative correlation between platelets and leukocytes (p= -0.03), weak negative correlation between platelets and erythrocytes (p= -0.3) and a strong positive correlation between leukocytes and erythrocytes (ρ = 0.75) were noted. Although, BP did not reach the desired mean of one million platelets (979300 ± 79631 cells / μL), both protocols, A and B (4.42 ± 1.61 and 3.85 ± 1.55 times more platelets than total blood, respectively) (p <0.05) were efficient in concentrating platelets. Platelet activation was present in 26.55 ± 6.72% of the PA platelets and 26.25 ± 7.03% in PB (p> 0.05). PA and PB presented low erythrocyte concentration (p> 0.05), and PA had more leukocytes (p <0.05) than PB, with higher concentrations of basophils that were segmented, and lymphocytes.

RESUMO: Foi proposto avaliar dois protocolos (PA e PB) para obtenção de plasma rico em plaquetas (PRP) canino quanto a celularidade. Foram utilizados 20 cães sadios e coletadas amostras sanguíneas, sendo acondicionados em dois tubos de citrato de sódio a 3,2%. O PA utilizando centrifugação dupla com 210 xG e 370 xG e PB utilizando centrifugação dupla com 140 xG e 330 xG. Amostras de PRP dos protocolos foram destinadas a contagem plaquetária, eritrocitária e leucocitária em câmara de Neubauer, contagem diferencial leucocitária e observação morfológica plaquetária em esfregaços sanguíneos. Analisou-se os dados (médias e desvios padrão) pelo Teste t com 95% de probabilidade (p<0,05) utilizando-se correlação de Pearson para testar a relação entre a contagem de plaquetas e eritrócitos, plaquetas e leucócitos e leucócitos em relação aos eritrócitos. Houve correlação negativa muito fraca entre plaquetas e leucócitos (ρ= -0,03), negativa fraca entre plaquetas e eritrócitos (ρ= -0,3) e correlação positiva forte entre leucócitos e eritrócitos (ρ=0,75). Embora o PB não tenha alcançando a média de um milhão de plaquetas desejado (979300 ± 79631 células/µL), ambos os protocolos, A e B (4,42 ± 1,61 e 3,85 ± 1,55 vezes mais plaquetas que o sangue total, respectivamente) (p<0,05), foram eficientes em concentrar plaquetas. A ativação plaquetária esteve presente em 26,55 ± 6,72 % das plaquetas do PA e 26,25 ± 7,03 % nas do PB (p>0,05). PA e PB apresentaram baixa concentração eritrocitária (p>0,05) e PA apresentou mais leucócitos (p<0,05) que PB, com maiores concentrações de basófilos, segmentados e linfócitos.

Nanostructured platelet-rich plasma: state of art in dental treatments / Plasma-rico em plaquetas nanoestruturado: estado da arte nos tratamentos dentais

Objectives: Reviewing information available about platelet-rich plasma (PRP) applied to dental treatments, introducing the general concept of PRP, as well as analyzing actual data about, and challenges faced by, the dental field. Data & sources: The current study analyzed the most informative publications about PRP application available in this field and gathered the maximum information about it as possible. Conclusions: PRP use, either alone or in association with other biomaterials, can significantly favor different fields such as tissue engineering, since it is an innovative technique that attracts the interest of clinicians and basic scientists. However, it is necessary conducting better designed and controlled experiments to enable successful tissue healing based on PRP use. Clinical significance: The current review can be used by clinicians as source of information about the actual rules and protocols adopted in the herein addressed field, besides providing specific examples of such applications. (AU)

Objetivos: Revisar as informações disponíveis sobre o plasma-rico em plaquetas (PRP) aplicado a tratamentos odontológicos, introduzir o conceito geral de PRP e analisar dados reais sobre os desafios enfrentados pelo campo odontológico. Dados e fontes: O presente estudo analisou as publicações mais informativas sobre a aplicação do PRP disponíveis neste campo e reuniu o máximo de informações possível. Conclusões: O uso do PRP, isoladamente ou em associação com outros biomateriais, pode favorecer significativamente diferentes campos, como a engenharia de tecidos, uma vez que é uma técnica inovadora que atrai o interesse de clínicos e cientistas básicos. No entanto, é necessário realizar experimentos mais bem projetados e controlados para permitir a cura bem-sucedida dos tecidos com base no uso do PRP. Significado clínico: A revisão atual pode ser usada pelos médicos como fonte de informações sobre as regras e protocolos atuais adotados no campo aqui tratado, além de fornecer exemplos específicos de tais aplicações.(AU)

Regeneración ósea como un ejemplo de ingeniería tisular en odontología, con énfasis en el desarrollo de los andamios / Regeneração óssea como exemplo de engenharia de tecidos em odontologia, com ênfase no desenvolvimento de andaimes / Bone regeneration as an example of tissue engineering in dentistry, with an emphasis on the development of scaffolds

Resumen La ingeniería tisular es un área científica multidisciplinaria la cual tiene como finalidad terapéutica restaurar, sustituir o incrementar las actividades funcionales de los tejidos orgánicos. Objetivos: Realizar una revisión de la literatura sobre la ingeniería tisular a nivel del área bucomaxilofacial. Métodos: Se realizó una búsqueda bibliográfica mediante los portales PubMed MEDLINE, Google Scholar, y LILACS, usando los términos "células madre, regeneración ósea y factores de crecimiento tisular". Resultados: Se obtuvieron 193 resultados positivos, de los cuales 24 se utilizaron para el desarrollo del presente trabajo. Discusión: Han sido expuestos varios biomateriales capaces de propiciar la neoformación ósea, siendo esencial su correcta manipulación, la conformación de una arquitectura adecuada y la sinergia de las diversas propiedades. Conclusiones: Los andamios son los que brindan mayor oferta para su uso y la elección de cada uno de ellos no depende del material en sí mismo.

Resumo: A engenharia de tecidos é uma área científica multidisciplinar cujo objetivo é restaurar, substituir e aumentar as atividades funcionais dos tecidos orgânicos. Objetivos: O objetivo deste trabalho é revisar a literatura sobre engenharia de tecidos no nível da área bucomaxilofacial. Métodos: Foi realizada uma pesquisa bibliográfica no portals PubMed MEDLINE, Google Scholar, e LILACS, utilizando os termos "células-tronco, regeneração óssea e fatores de crescimento tecidual". Resultados: foram obtidos 193 resultados positivos, dos quais 24 foram utilizados para o desenvolvimento deste trabalho. Discussão: Vários biomateriais capazes de promover a neoformação óssea foram expostos, sendo sua manipulação correta, a conformação de uma arquitetura adequada e a sinergia das várias propriedades. Conclusões: são os andaimes que oferecem a melhor oferta para seu uso e a escolha de cada um não depende do material propriamente dito.

Abstract Tissue engineering is a multidisciplinary scientific area that has the therapeutic purpose of restoring, replacing, or increasing the functional activities of organic tissues. Objective: This work aims to review the literature on tissue engineering in oral and maxillofacial procedures. Methods: A bibliographic search was conducted in PubMed MEDLINE, Google Scholar, and LILACS, using the terms "stem cells," "bone regeneration," and "tissue growth factors." Results: In total, 193 positive results were obtained, of which 24 were used for this paper. Discussion: Several biomaterials capable of promoting bone neoformation have been described. They need to be adequately manipulated and have the right architecture and achieve the synergy of the various properties. Conclusions: Scaffolds have the widest uses, and selecting one does not depend on the material itself.

Expressão de neurotrofinas e de seus receptores no osteossarcoma primário / Expression of neurotrophins and their receptors in primary osteosarcoma

RESUMO Objetivo: determinar a expressão de neurotrofinas e seus receptores tirosina quinases em pacientes com osteossarcoma (OS) e sua correlação com desfechos clínicos. Métodos: biópsias de tumores primários de pacientes com OS tratados em uma única instituição, consecutivamente, entre 2002 e 2015, foram analisados através de imuno-histoquímica para expressão de receptores de tirosina quinase A e B (TrKA e TrKB), fator de crescimento neural (NGF) e fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF). De forma independente, dois patologistas classificaram os marcadores de imuno-histoquímica como negativos (negativos e focais fracos) ou positivos (moderado focal/difuso ou forte focal/difuso). Resultados: foram analisados dados de 19 pacientes (10 do sexo feminino e 9 do masculino) com mediana de idade de 12 anos (5 a 17,3 anos). Dos tumores, 83,3% estavam localizados em membros inferiores e 63,2% dos pacientes eram metastáticos ao diagnóstico. A sobrevida global em cinco anos foi de 55,3%. BDNF foi positivo em 16 pacientes (84%) e NGF em 14 pacientes (73%). TrKA e TrKB apresentaram coloração positiva em quatro (21,1%) e oito (42,1%) pacientes, respectivamente. A análise de sobrevida não demonstrou diferença significativa entre receptores TrK e neurotrofinas. Conclusão: amostras de OS primário expressam neurotrofinas e receptores TrK através de imuno-histoquímica. Estudos futuros podem auxiliar na identificação do papel das mesmas na patogênese do OS e determinar se há possível correlação prognóstica.

ABSTRACT Objective: to determine the expression of neurotrophins and their tyrosine-kinase receptors in patients with osteosarcoma (OS) and their correlation with clinical outcomes. Methods: we applied immunohistochemistry to biopsy specimens of patients consecutively treated for primary OS at a single institution between 2002 and 2015, analyzing them for expression receptors of tyrosine kinase A and B (TrKA and TrKB), neural growth factor (NGF) and brain derived neurotrophic factor (BDNF). Independently, two pathologists classified the immunohistochemical markers as negative (negative or weak focal) or positive (moderate focal/diffuse or strong focal/diffuse). Results: we analyzed data from 19 patients (10 females and 9 males), with median age of 12 years (5 to 17.3). Tumors' location were 83.3% in the lower limbs, and 63.2% of patients had metastases at diagnosis. Five-year overall survival was 55.3%. BDNF was positive in 16 patients (84%) and NGF in 14 (73%). TrKA and TrKB presented positive staining in four (21,1%) and eight (42,1%) patients, respectively. Survival analysis showed no significant difference between TrK receptors and neurotrophins. Conclusion: primary OS samples express neurotrophins and TrK receptors by immunohistochemistry. Future studies should explore their role in OS pathogenesis and determine their prognostic significance in larger cohorts.

Fibrina rica em plaquetas injetável (I-PRF): caracterização celular, morfológica e proteica / Injectable platelet-rich fibrin (I-PRF): cellular, morphological and protein characterization

Estudos experimentais demonstram o efeito da fibrina rica em plaquetas (PRF) nas técnicas de regeneração tecidual otimizando o processo de reparo; podendo ser utilizada na forma líquida (i-PRF). O objetivo dessa pesquisa foi determinar a composição celular do i-PRF, caracterizar sua morfologia a nível microscópico, investigar a expressão de proteínas envolvidas no processo de reparo e avaliar sua interação com um material biocerâmico a partir de um modelo in vitro. Materiais e métodos: Foram colhidas amostras sanguíneas de 15 voluntários humanos para comparação dos constituintes celulares entre o i-PRF e o sangue periférico. Amostras de i-PRF e de coágulos sanguíneos foram cultivadas in vitro durante 10 dias. O sobrenadante das amostras foi colhido nos intervalos 1h, 8h, 24h, 3 dias e 10 dias para quantificação dos fatores de crescimento PDGF-AB e VEGF por ELISA. Amostras foram tratadas histologicamente para caracterização morfológica e submetidas à marcação imuno-histoquímica para as proteínas IL-10, OC e TGF-ß. Investigou-se a expressão gênica do fator de transcrição Colágeno tipo 1. Foram preparadas amostras do i-PRF misturadas com cerâmica bioativa granulada (HA/ß-TCP) para avaliação da interação entre esses compostos através MEV. Resultados: Observou-se maior concentração de leucócitos (8.124 ± 1.419) e plaquetas (3.96x105 ± 0.72) no i-PRF em comparação ao sangue periférico (p <0.001), com uma maior proporção de linfócitos (60%) no i-PRF. Maiores níveis de VEGF foram liberados a partir do coágulo sanguíneo (1933 ± 704) em relação ao i-PRF (852 ± 376; p <0.001). Não foram observadas diferenças entre os níveis de PDGF-AB. Ensaio imuno-histoquímico demonstrou imunomarcação para TGF-ß, IL-10 e Osteocalcina no grupo i-PRF. Análises por RT-PCR demonstraram aumento da expressão de Colágeno tipo 1 no grupo do i-PRF. Microscopicamente observou-se a formação de grandes aglomerados de plaquetas e fibrina e uma rede de fibrina em distribuição tridimensional espacial com a presença de linfócitos distribuídos de forma homogênea. As imagens por MEV apresentaram boa integração entre os grânulos de cerâmica e a malha de fibrina formada pelo i-PRF. Conclusões: Análises morfológicas revelaram que o processo de produção do i-PRF resulta em uma rede tridimensional de fibrina a qual incorpora plaquetas, leucócitos, colágeno tipo I, osteocalcina e fatores de crescimento. Assim, o i-PRF torna-se uma boa abordagem como um material líquido para ser associado a outros biomateriais (AU).

One of the great challenges of clinical research is the development of new biomaterials that aid in tissue regeneration and accelerate the healing process. Experimental studies demonstrate the effect of platelet rich fibrin (PRF) on tissue regeneration techniques thereby optimizing the repair process, and can also be used in liquid form (i-PRF). The objective of this research was to determine the cellular composition of i-PRF, to characterize its morphology at a microscopic level, to investigate the expression of proteins involved in the repair process and to evaluate its interaction with a bioceramic material from an in vitro model. Materials and methods: Blood samples were collected from 15 human volunteers to compare the cellular constituents between i-PRF and peripheral blood. I-PRF and blood clot samples were cultured in vitro for 10 days. The supernatant of the samples was collected at intervals of 1h, 8h, 24h, 3 days and 10 days for quantification of PDGF-AB and VEGF growth factors by ELISA. Samples were histologically treated for morphological characterization and submitted to the immunohistochemical methodology for the labeling of IL-10, OC and TGF-ß proteins. The gene expression of collagen transcription factor type 1 was investigated. I-PRF samples mixed with granular bioactive ceramics (HA/ß-TCP) were prepared to evaluate the interaction between these compounds through SEM. Results: A higher concentration of leukocytes (8.124 ± 1.419) and platelets (3.96x105 ± 0.72) in i-PRF compared to peripheral blood (p <0.001) was observed, with a higher proportion of lymphocytes (60%) in i-PRF. Higher levels of VEGF were released from the blood clot (1933 ± 704) compared to i-PRF (852 ± 376; p <0.001); no differences were observed between PDGF-AB levels. Immunohistochemical assay demonstrated expression for TGF-ß, IL-10 and Osteocalcin in the i-PRF group. RT-PCR analysis showed increased expression of collagen type 1 in the i-PRF group. The formation of large platelets, fibrin clusters and a fibrin network in a three-dimensional spatial and homogeneous distribution were observed microscopically. SEM images showed good integration between the ceramic granules and the fibrin mesh formed by i-PRF. Conclusions: Morphological analyses revealed that the slow polymerization of i-PRF results in a three-dimensional fibrin network embedding platelets, leukocytes, type I collagen, osteocalcin, and growth factors. Thus, i-PRF becomes a good approach as an injectable material to be associated with other biomaterials (AU).